*§ 10-1. Метады вывучэння клеткі
Световая микроскопия. Первым методом, использованным для открытия и изучения клеток, была световая микроскопия. Увеличение объекта в световом микроскопе достигается с помощью линз, через которые проходит свет. При этом максимальное увеличение составляет около 1500 раз. Однако главной характеристикой микроскопа является разрешающая способность (разрешение) — минимальное расстояние между двумя объектами, которые можно распознать отдельно. Отдельная частица будет видна только в том случае, если по размеру она не меньше разрешения микроскопа. Например, разрешающая способность человеческого глаза составляет около
Разрешение характеризует четкость изображения. Без повышения разрешающей способности нет смысла в большем увеличении. Если линзы не дают возможности различать детали объекта, то изображение будет размытым, и при большем увеличении будет получено просто более крупное, но такое же нечеткое изображение. |
Разрешение светового микроскопа ограничивается длиной световой волны. Даже при использовании самого коротковолнового видимого света — фиолетового — можно достичь разрешения лишь около 200 нм. При такой разрешающей способности видны самые крупные компоненты клеток — ядро, пластиды, вакуоли, митохондрии, клеточные стенки. Более мелкие клеточные структуры или не видны вообще, или их детали различаются с трудом.
Другая трудность применения световой микроскопии состоит в том, что большинство клеточных компонентов прозрачно. Для увеличения контрастности часто используют различные методы окраски клеток. При этом клеточные структуры окрашиваются специальными красителями в разные цвета. Некоторые красители — их называют прижизненными — не токсичны и используются для окрашивания живых клеток. Однако большинство красителей токсично для клеток и вызывает их гибель.
![]() |
1. Ахарактарызуйце метады светлавой і электроннай мікраскапіі. Што яны дазваляюць вывучыць? 2. На чым заснаваны метады цыта- і гістахіміі? Для чаго яны ўжываюцца? Што ўяўляе сабой аўтарадыяграфія? 3. Ахарактарызуйце метад дыферэнцыяльнага цэнтрыфугавання. У чым заключаецца асаблівасць цэнтрыфугавання ў градыенце шчыльнасці? 4. У якіх адзінках выражаюць хуткасць асаджэння часціц пры цэнтрыфугаванні? Ці можна падзяліць кампаненты суспензіі, якія маюць аднолькавыя памеры, з дапамогай цэнтрыфугі? 5. Для чаго выкарыстоўваецца метад рэнтгенаструктурнага аналізу? 6. На чым заснаваны і для чаго выкарыстоўваюцца метады клетачных культур і мікрахірургіі? 7*. Падбярыце метады, якія падыходзяць для кожнага цыталагічнага даследавання. Растлумачце свой выбар. а) Вызначэнне таўшчыні цытаплазматычнай мембраны клеткі; б) выдзяленне з нейронаў ядзер і іх збор у асобную прабірку для далейшага вывучэння; в) падлік колькасці лейкапластаў (бясколерных пластыд) у клетках клубня бульбы; г) вызначэнне формы малекулы бялку і пабудова яе аб'ёмнага відарыса; д) размнажэнне ў лабараторыі лейкацытаў чалавека і вызначэнне, ці змогуць яны выконваць свае функцыі без ядра; е) падлік колькасці эрытрацытаў у 1 мм3 крыві чалавека. 8*. У цяпершні час метад клетачных культур знаходзіць прымяненне не толькі ў цыталагічных даследаваннях. Прапануйце іншыя магчымыя галіны яго практычнага выкарыстання. |