*§ 10-1. Метады вывучэння клеткі

Световая микроскопия. Первым методом, использованным для открытия и изучения клеток, была световая микроскопия. Увеличение объекта в световом микроскопе достигается с помощью линз, через которые проходит свет. При этом максимальное увеличение составляет около 1500 раз. Однако главной характеристикой микроскопа является разрешающая способность (разрешение) — минимальное расстояние между двумя объектами, которые можно распознать отдельно. Отдельная частица будет видна только в том случае, если по размеру она не меньше разрешения микроскопа. Например, разрешающая способность человеческого глаза составляет около 0,1 мм.

 

            Разрешение характеризует четкость изображения. Без повышения разрешающей способности нет смысла в большем увеличении. Если линзы не дают возможности различать детали объекта, то изображение будет размытым, и при большем увеличении будет получено просто более крупное, но такое же нечеткое изображение.

        

Разрешение светового микроскопа ограничивается длиной световой волны. Даже при использовании самого коротковолнового видимого света — фиолетового — можно достичь разрешения лишь около 200 нм. При такой разрешающей способности видны самые крупные компоненты клеток — ядро, пластиды, вакуоли, митохондрии, клеточные стенки. Более мелкие клеточные структуры или не видны вообще, или их детали различаются с трудом.

         Другая трудность применения световой микроскопии состоит в том, что большинство клеточных компонентов прозрачно. Для увеличения контрастности часто используют различные методы окраски клеток. При этом клеточные структуры окрашиваются специальными красителями в разные цвета. Некоторые красители — их называют прижизненными — не токсичны и используются для окрашивания живых клеток. Однако большинство красителей токсично для клеток и вызывает их гибель.

1. Ахарактарызуйце метады светлавой і электроннай мікраскапіі. Што яны дазваляюць вывучыць?

2. На чым заснаваны метады цыта- і гістахіміі? Для чаго яны ўжываюцца? Што ўяўляе сабой аўтарадыяграфія?

3. Ахарактарызуйце метад дыферэнцыяльнага цэнтрыфугавання. У чым заключаецца асаблівасць цэнтрыфугавання ў градыенце шчыльнасці?

4. У якіх адзінках выражаюць хуткасць асаджэння часціц пры цэнтрыфугаванні? Ці можна падзяліць кампаненты суспензіі, якія маюць аднолькавыя памеры, з дапамогай цэнтрыфугі?

5. Для чаго выкарыстоўваецца метад рэнтгенаструктурнага аналізу?

6. На чым заснаваны і для чаго выкарыстоўваюцца метады клетачных культур і мікрахірургіі?

7*. Падбярыце метады, якія падыходзяць для кожнага цыталагічнага даследавання. Растлумачце свой выбар.

а) Вызначэнне таўшчыні цытаплазматычнай мембраны клеткі;

б) выдзяленне з нейронаў ядзер і іх збор у асобную прабірку для далейшага вывучэння;

в) падлік колькасці лейкапластаў (бясколерных пластыд) у клетках клубня бульбы;

г) вызначэнне формы малекулы бялку і пабудова яе аб'ёмнага відарыса;

д) размнажэнне ў лабараторыі лейкацытаў чалавека і вызначэнне, ці змогуць яны выконваць свае функцыі без ядра;

е) падлік колькасці эрытрацытаў у 1 мм3 крыві чалавека.

8*. У цяпершні час метад клетачных культур знаходзіць прымяненне не толькі ў цыталагічных даследаваннях. Прапануйце іншыя магчымыя галіны яго практычнага выкарыстання.