*§ 10-1. Методы изучения клетки
С помощью методов цитохимии и гистохимии изучают химическую природу различных структур клеток и тканей, распределение химических соединений, их локализацию и превращения. Эти методы основаны на использовании цветных реакций для определения в клетках различных веществ. Под действием специально подобранных реактивов происходит окрашивание определенных соединений в клетке. По степени и характеру окраски с помощью микроскопии судят о количестве или активности изучаемых веществ.
Методы цито- и гистохимии должны обеспечивать связывание красителя только с исследуемым соединением, сохранение структуры клетки и локализации вещества в ней. Благодаря этим методам обнаруживают белки и аминокислоты, нуклеиновые кислоты, углеводы, липиды, неорганические вещества и др.
При цитохимическом определении белков, нуклеиновых кислот, углеводов и липидов, как правило, выявляются определенные структурные части их молекул. Например, в нуклеиновых кислотах — азотистые основания, остатки фосфорной кислоты или пентоз. Определение ферментов основано на выявлении продуктов катализируемых ими реакций. При этом клетки помещаются в среду, содержащую субстрат исследуемого фермента, а образующийся продукт определяется при помощи цветной реакции. Окрашенный продукт не должен обладать высокой растворимостью, чтобы располагаться именно в тех частях клетки, где он был синтезирован. По интенсивности окраски можно определить уровень активности фермента. В настоящее время методы цитохимии позволяют выявлять множество различных ферментов.
Важную роль в цитохимических исследованиях играет авторадиография. Этот метод основан на введении в клетки веществ, содержащих радиоактивные метки (3H, 14С